Objetivos e Atividades
Este projeto tem como finalidade avaliar o papel do sistema endocanabinóide no processo de cicatrização e a capacidade de o modular para fins terapêuticos. Para este efeito, o estudo foi concebido para avaliar o efeito de fármacos que têm como alvo molecular o sistema endocanabinóide, nomeadamente ligandos dos receptores de CB1 e CB2 e inibidores de enzimas envolvidas no metabolismo dos endocanabinóides, em modelos de fibrose dérmica de origem humana.
O projeto tem duas abordagens diferentes; a primeira é focada em mecanismos celulares autocrinos/parácrinos na pele utilizando métodos in vitro (culturas primárias de queratinócitos e fibroblastos humanos). Neste modelo celular, os níveis de endocanabinóides, os receptores e enzimas serão avaliados quer em condições basais quer após a ativação de fibroblastos. Será ainda avaliado o efeito de fármacos com alvo no sistema endocanabinóide sobre este modelo celular de fibrose.
Resultados Esperados/Atingidos
Dos resultados já obtidos destaca-se a presença de receptores canabinoides (CB1 e CB2) em culturas primárias de fibroblastos de humanos adultos, e a sua resposta à estimulação com a citocina multifuncional transforming growth beta (TGF-β).
Foi demonstrado que o TGF-β aumenta a expressão de receptores CB1 e CB2 nos fibroblastos humanos. Adicionalmente, a inativação farmacológica do receptor CB1 reduz a diferenciação dos fibroblastos em miofibroblastos e a produção de colagénio induzida pelo TGF-β, in vitro. O efeito sobre a produção de colagénio é dependente da concentração. A activação do receptor CB1 induz, por outro lado, a produção de colagénio na mesma cultura celular. A activação do receptor CB1 aumenta ainda a reepitelização e a cicatrização em culturas de pele humanas ex vivo. Em contrapartida, a activação do receptor CB2 em fibroblastos humanos, reduz a expressão da proteína alfa smooth actine (α-SMA) |